土壤微生物生物量碳（MBC）含量檢測-重鉻酸鉀外加熱法

土壤微生物生物量碳（MBC）是指土壤中所有活體微生物身體所含的碳元素的總和，其與土壤有機(jī)碳（SOC）共同體現(xiàn)了土壤中有機(jī)質(zhì)的含量情況，在土壤有機(jī)碳庫中占有至關(guān)重要的地位。土壤微生物生物量碳在自然界的碳循環(huán)中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，它是全球碳循環(huán)中的一個重要碳庫，能夠參與碳的分配和轉(zhuǎn)化。同時，土壤微生物生物量碳還能夠作為評價土壤質(zhì)量、土壤肥力和土壤健康狀況的重要指標(biāo)。

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操作步驟

1）土壤樣品熏蒸 

稱取相當(dāng)于 5 g 烘干土重的鮮土，放入培養(yǎng)皿中，連同盛有50 mL 無乙醇氯仿的小燒杯（里面放入少量碎瓷片或小玻璃珠，防止暴沸），和盛有 30mL 1mol/L NaOH 的小燒杯一起放入真空干燥器內(nèi)（一次可放入 40 個左右的培養(yǎng)皿）。用少量凡士林密封干燥器，抽真空，使氯仿沸騰，并持續(xù) 2 min 以上，關(guān)閉真空干燥器的閥門，然后將真空干燥器放入 25℃暗室中，保持 24h。24 h 后，取出盛有氯仿（倒回瓶中重復(fù)使用）和 NaOH 的小燒杯。再用真空泵反復(fù)抽氣 4 次，每次 3 min 以上，直到土壤聞不到氯仿味為止(并不安全的做法，建議抽氣時間延長，次數(shù)3次即可)。另稱取與熏蒸處理組數(shù)目等量的培養(yǎng)土壤放入另一干燥器中，但不熏蒸，作為對照土壤。

2）土壤微生物碳的測定

從干燥器中取出土樣，放入80 mL 塑料瓶中，加入 0.5mol/L K2SO4溶液 100 mL（1:4 土水比），振蕩 30 min（25℃，200 r/min-1）后迅速用定性中速濾紙過濾，濾液立即測定或-15℃下保存。吸取5 mL浸提液于100 mL 油浴管（高硼硅玻璃管），加入10 mL 0.018 mol/L K2Cr2O7 - H2SO4溶液（H2SO4 濃度為 12mol/L）【注意：浸提液的量根據(jù)土壤微生物碳量考慮，一般越高，取用浸提液越少，這塊需要進(jìn)行多梯度的預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定最佳浸提液與K2Cr2O7 - H2SO4添加量比值】，放入少量石英沙（防暴沸），搖勻后置于 175 ± 1℃的油浴鍋中（一般建議選用二甲基硅油）煮沸保持 10 min，冷卻后將溶液轉(zhuǎn)移到 150 mL 的三角瓶中，使總體積約為 80 mL，加一滴鄰啡羅啉指示劑（注：如果油浴后溶液呈深綠色，滴加1/3滴的鄰菲羅啉，滴管輕輕碰觸三角瓶內(nèi)壁即可），用 0.05 mol/L FeSO4溶液滴定至終點(diǎn)。